Ce travail a pour objectif l’évaluation de la protection antimicrobienne d’une solution pour bain de bouche, utilisant l’huile essentielle d’une plante spontanée de la flore Marocaine, thymus satureioides C., comme conservateur antimicrobien. La formule du bain de bouche avait un haut risque microbiologique et seule l’HE de thymus satureioides C. a été utilisée comme agent conservateur antimicrobien à raison de 0,1 %. L’essai de l’efficacité de la conservation antimicrobienne a été conduit selon les recommandations de la pharmacopée européenne, alors que le protocole de la démonstration de l’efficacité du milieu neutralisant a été réalisé selon la norme ISO 11930:2019. Cinq souches microbiennes référenciées ont été utilisées au cours de ces essais à savoir : Pseudomonas aeruginosa ATCC® 9027, Staphylococcus aureus ATCC® 43300, Escherichia coli ATCC® 11775, Candida albicans L11 et Aspergillus niger M100. Les résultats ont montré que la règle [Nvf ≥ 0,5Nvn et Nvn est proche de Nv] a été respectée et que par conséquence l’efficacité du milieu neutralisant a été confirmée. Les résultats du challenge test obtenus pour les souches testées ont montré que les taux de réduction des inoculums bactériens et fongiques initiaux ont été au-dessus de ce qui a été exigé par les critères d’acceptation A de la Pharmacopée européenne durant les 28 jours du test. Concluons, notre étude a pu prouver que, dans les conditions du test, l’HE de thymus satureioides C. a une efficacité conservatrice et pourrait être considérée comme un nouvel agent conservateur d’origine naturelle alternatif pour les préparations pharma-cosmétiques.