Le milieu de culture est un facteur important pour la croissance des plantules en culture in vitro. Ceci varie d’une espèce à une autre. La régénération et la floraison des vitroplants d’Ocimum canum a été effectuée par les techniques de culture in vitro. L’objectif de notre travail est de trouver un bon milieu de culture pouvant permettre une bonne régénération et la floraison in vitro des plantules d’O. canum. Trois milieux de culture à savoir : Le milieu de Murashige et Skoog (MS), celui dilué de moitié (MS / 2) et celui dilué au quart (MS / 4) ont été testé séparément sur trois lots composés chacun de 24 microboutures pendant la micropropagation. Au bout de huit semaines, les plantules ont présenté une morphogenèse normale et un taux d’enracinement plus élevé sur le milieu MS / 2. Quant à la floraison, elle est observée à partir de la huitième semaine de culture et au bout de dix semaines, le taux de floraison est de 20 % en milieu MS, 70 % en milieu MS / 2 et 40 % en milieu MS / 4.