Le présent travail avait comme objectif d’évaluer l’effet de différents milieux de culture (PDA, SPDA, SDA, Maïs et Blé) sur le développement in vitro des mycéliums et le rendement en sporophores du Pleurotus ostreatus var. P969. Il s’est avéré que le diamètre (p = 0,042) et la vitesse (p < 0,001) de croissance du mycélium ont varié en fonction des différents milieux. Le milieu SDA a permis un bon développement du mycélium en culture in vitro (59,50 mm de diamètre mycélien). Le milieu à base du blé a été plus vulnérable aux infections en culture in vitro et le moins productif en mycélium. Les différents milieux utilisés en culture in vitro, n’ont pas eu d’influence significative sur les paramètres de rendement du champignon après fructification.