Ce travail porte sur l’extraction de l’huile essentielle d’une plante spontanée de la flore Marocaine, le Laurus nobilis L., sa caractérisation sur le plan physicochimique et l’étude de son activité microbiologique. La composition de l’huile essentielle extraite par hydrodistillation des feuilles a été analysée par GC / FID. La teneur moyenne en huile essentielle est de 1,7 % par rapport à la matière sèche. Quarante-cinq composés ont été identifiés. L’Eucalyptol (30,52 %) était quantitativement le composé majoritaire. Sur les cinq souches testées (trois bactéries et deux champignons), l’Aromatogramme a montré qu’Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa sont insensibles à la concentration de 10 µL de l’huile essentielle, par ailleurs, cette dernière s’est montrée très active sur les trois souches restantes. Outre, la détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) et la concentration minimale bactéricides / Fongicides (CMB) ont confirmé, qu’à la concentration de 5 mg / mL, l’huile essentielle du Laurus nobilis L. a une activité bactériostatique sur Staphylococcus aureus, fongistatique sur Aspergillus niger, et fongicide sur Candida albicans. Bien plus, l’huile essentielle du Laurus nobilis L. peut présenter, dans le domaine de la conservation antimicrobienne, des activités biologiques prometteuses et moins risquées que celles des produits de synthèse. Des applications dans l’industrie pharmaceutique et alimentaire sont désormais possibles.